SDF-1-CXCR7生物学轴与甲状腺乳头状癌临床恶性生物学特征的关系及分子学机制的研究

CXCR7是近年来被确定命名的趋化因子受体，研究显示CXCR7与多种恶性肿瘤的发生、侵袭及转移潜能呈阳性相关，推测SDF-1-CXCR7生物学轴活化可能是一种肿瘤促进因素。申请人首次证实CXCR7在甲状腺乳头状癌（papillary thyroid carcinoma ，PTC）组织中高表达。本研究通过采集临床标本及资料，研究SDF-1-CXCR7活化与PTC恶性生物学特征的关系，揭示其与PTC预后的相关性。通过构建"过表达"和"敲除"CXCR7的PTC细胞株，研究SDF-1-CXCR7生物学轴对PTC细胞各种功能的影响，筛选CXCR7可能调控的下游基因，研究其分子作用机制。建立接种"过表达"和"敲除"CXCR7 PTC细胞株的裸鼠动物模型，观察"敲除"CXCR7对PTC恶性生物学行为和相关基因表达的影响，寻找临床治疗PTC的新的干预靶点。

甲状腺癌乳头状癌是甲状腺癌最常见的病理类型，虽然多数甲状腺乳头状癌患者预后较好，但容易出现颈部淋巴结转移。本课题研究了CXCR7及其配体SDF-1在甲状腺乳头状癌侵袭转移中的作用。在本研究中我们发现与癌旁组织、良性甲状腺疾病组织相比，乳头状癌组织中CXCR7和SDF-1阳性表达率增高，而且二者的阳性表达与淋巴结转移相关。之后我们用基因转染技术构建了稳定表达CXCR7-cDNA和CXCR7-shRNA的乳头状癌细胞株，应用MTT、PI单染、7-AAD单染、侵袭、管腔生成、裸鼠成瘤等实验进一步研究CXCR7过表达和表达敲减对甲状腺乳头状癌细胞的细胞功能的影响。我们发现CXCR7 能够调控甲状腺乳头状癌细胞的增殖、细胞周期、凋亡及侵袭，调控参与S-G2期转换的细胞周期调控蛋白的表达，并调控血管生成及肿瘤的生长。CXCR7过表达促进增殖；导致G2/M期明显增高，S期明显降低；cyclin A, CDK2 and PCNA表达上调，p21 and p57表达下调；抑制凋亡；提高细胞侵袭能力及血管形成能力；促进肿瘤的生长。CXCR7表达敲减则抑制增殖；导致G2/M期明显降低，S期明显增高；cyclin A, CDK2 and PCNA表达下调，p21 and p57表达上调；诱导凋亡；降低细胞侵袭能力及血管形成能力；抑制肿瘤的生长。我们检测CXCR7过表达K1细胞和K1对照细胞之间差异表达基因，通过生物信息学分析，分析了CXCR7可能参与信号通路及调控下游靶基因，为接下来的研究提供了方向。