5-HT介导AC-cAMP通路多基因突变与抑郁症的关系

Depression is polygenic complexity disease, to clarify the cause and prevention of recurrence belong to the problem. This research focuses on recurrent depression patients with 5 - HT and AC - cAMP path (5 - HT2A, G - β 3, ACDY, PDE, BDNF and CREB) gene polymorphism on research, the content include：① Use the SVM theory，through the completed 800 patients with recurrent episodes of depression patients 3-6 years of clinical follow-up，and including control (1000) and a related SNPs database，Constructing "gene - disease features" diagnosis model 1（M1），screen out label SNP (tSNP).；②Starting in 200 cases of patients, weight measuring tSNP , make use of M1 to issue judgment hypothesis ，for example : clinical medicine, the risk of recurrence , through 1-2 years of clinic Use its biological phenotype in a laboratory diagnosis al follow-up, verify hypothesis, and correct diagnosis model 2（M2）; ③ Make use of HapMapⅡ,around tSNP screening candidate function SNP (cSNP), using M2 to verification the hypothesis that gene mutation of the 5 - HT - AC - cAMP path increased depression illness or the risk of recurrence; ④ Empoly the gene transfection technique, to verify the mutation to the influence of related gene expression, clear cSNP landmark significance. Thereby, proven depression relapse cause and mechanism, use its biological phenotype to make a laboratory diagnosis, for the early diagnosis of depression, rational drug use, prevent recurrence and genetic counseling provide theoretical basis.

抑郁症属多基因复杂性疾病，阐明病因、预防复发均属难题。本研究拟围绕反复发作抑郁症患者的5-HT及AC- cAMP通路（5-HT2A、G-β3、ACDY、PDE、BDNF及CREB等）基因多态性展开研究，主要包括以下内容：①采用SVM理论，通过对已完成的800例反复发作抑郁症患者3-6年的临床随访，以及包括对照（1000名）的18个相关SNPs数据库，构建"基因-疾病特征"诊断模型1（M1），筛出标签SNP(tSNP)；②纳入首发患者200例，重测tSNP，利用M1做出临床用药、复发风险等判断假设，通过临床1-2年的随访，验证假设，并修正为诊断模型2（M2）；③利用HapMapⅡ，围绕的 tSNP筛选候选功能SNP(cSNP)，利用M2验证5-HT-AC- cAMP通路多基因突变增加抑郁症患病或复发风险的假设；④采用基因转染技术，验证其突变对相关基因表达的影响，明确cSNP的标志性意义。

本课题主要完成了以下工作：①构建了1030例反复发作抑郁症患者（包括随访3年以上）的临床特征数据库；围绕5-HT介导的AC-cAMP通路，筛选了包括5-HT1A、5-HT2A 、CREB1、ADCY3、ADCY7、 BDNF、 NOS1、NET等目的基因的35个tagSNPs，完成了1030例患者和851健康对照SNP检测，构建目的基因tagSNPs数据库,建立SSRI类药物抵抗模型（SVM-SSRIS—R）。②利用SVM-SSRIs-R模型，完成了251例患者的临床疗效预测与验证。③采用FastTarget对448例患者DNA样本进行了检测，构建了患者组和300名健康对照的SNV数据库；④通过构建两种双荧光素酶报告质粒，分别转染到Hela细胞、SH-SY5Y细胞和IMR-32细胞中，体外验证突变型基因NET-182T和5-HTR2A rs6311 C等位基因表达水平。⑤探讨了抑郁模型大鼠中枢ERK1/2-NF-κB通路与抑郁的关系。. 主要成果:①发现病程特征、精神运动抑制、精神病性症状、自杀行为、CREB1基因多态性等被纳入初测模型（SVM-SSRIs-R-I）；修正后模型（SVM-SSRIs-R-II）与疗效临床验证一致率为87.7%，这对SSRIs抵抗的早期诊断有重要意义；②初步筛选出AC-cAMP通路上的CREB1rs16839883可能与抑郁症发病有关;BDNFrs10835210与CREB1rs16839883存在交互作用，BDNFrs10835210在反复发作抑郁症这一亚型中可能有更高的生物学标记意义；这一发现为抑郁症的实验室诊断提供了线索。③家族史阳性的抑郁症患者存在更多的突变位点，发现3个tagSNPs和5个SNVs突变， 其中的tagSNPs是ADCY9rs2531982、BDNFrs7124442和CREB1rs2551645，SNVs突变是PDE4Drs17725522、PDE4D rs27175、HTR1A rs34118353、SLC6A2rs5569和SLC6A2 rs998424，丰富了病因异质性假说。④SSRI类药物可能影响S100β激活的海马ERK1/2-NF-κB信号通路。