核仁素对氧化应激所致细胞凋亡的影响及其机制研究

核仁素是一种具有多种生物学功能RNA结合蛋白，但其在氧化应激所致凋亡中的发挥何种作用尚未见报道。申请者最近发现氧化应激所致凋亡过程中伴有核仁素表达下调，核仁素反义寡核苷酸可显著促进细胞凋亡发生，提示核仁素可能是重要的抗凋亡分子。通过对凋亡相关基因mRNA序列进行分析，发现多个基因的mRNA中含有完整的核仁素结合元件，推测核仁素可能通过与上述基因mRNA分子结合而影响后者的稳定性。本项目拟在上述研究的基础上，采用基因转染、反义寡核苷酸或RNA干扰技术探讨核仁素对氧化应激所致凋亡的影响；采用生物信息学、RT-PCR、Northern-blot研究核仁素对凋亡相关基因表达的影响；采用RNA凝胶滞留实验、紫外交联、蛋白质-RNA免疫共沉淀及mRNA稳定性分析深入探讨核仁素对凋亡相关基因的调控机制。开展本项目有助于阐释核仁素对氧化应激所致凋亡的影响及其机制，为相关疾病的防治提供新的思路和实验线索。