玉米CMS-S胞质不育基因蛋白质产物的鉴定和生物学功能研究

本项目在前期对玉米CMS-S胞质不育基因的DNA和RNA水平研究的基础之上，拟将开展胞质不育基因蛋白质水平的工作。通过BN PAGE（blue native PAGE），发现存在于不育胞质线粒体中的ORF77（或ORF17）蛋白质，探讨与ATP9和ATP合成酶复合物的相互关系；通过在大肠杆菌中分别表达orf77和orf17，获得大量的蛋白质，探索它们的功能，并且制备抗体进行Western blotting 和细胞学定位；通过将orf77和orf17基因DNA分别连接上靶向线粒体的前导序列和花粉特异启动子，转化正常胞质的玉米，观察转基因玉米的育性表现。综合以上的工作，直接证明ORF77（或ORF17）蛋白质在不育胞质线粒体中的存在，揭示orf77(或orf17)蛋白质产物的生物学作用，阐明S组CMS败育的机理。