PAR-1和PAR-4参与蛛网膜下腔出血大鼠脑内小胶质细胞活化的实验研究

脑出血等脑血管疾病中小胶质细胞（microglia，MG）活化所诱导的炎症在脑损伤中发挥着重要作用。但目前为止，蛛网膜下腔出血（SAH）后脑内MG的状态及其作用机制还不清楚。蛋白酶活化受体-1和4（PAR-1和PAR-4）分布于多种细胞表面，与配体结合后可能通过多种途径激活细胞产生各类炎性因子，造成脑内严重的炎症反应。本实验欲观察SAH后脑内MG表面PAR-1、PAR-4及其下游因子MAPK、NF-κB的活化情况，并探讨上述变化与MG释放炎性介质产生SAH后早期脑损伤（EBI）的关系；同时，还将观察抑制PAR-1和PAR-4 的表达对MG活化及炎性因子释放的拮抗作用及由此产生的缓解EBI的效应。本课题的目的是证实PAR-1和PAR-4活化参与了SAH后MG的激活，是造成SAH后EBI的关键因素，为阻断PAR-1/4受体-MG活化-炎性因子这条途径从而治疗SAH后EBI提供新的靶点。

本项目观察了蛛网膜下腔出血（SAH）后脑内小胶质细胞（MG）表面蛋白酶活化受体-1和4（PAR-1和PAR-4）及其下游因子p38MAPK和NF-κB的活化情况，并探讨了上述变化与小胶质细胞释放炎性介质产生SAH后早期脑损伤（EBI）的关系。另外，我们还观察了抑制PAR-1和PAR-4 的表达对MG活化及炎性因子释放的拮抗作用及由此产生的缓解EBI的效应。本研究项目完成情况良好，实验步骤均按照申请标书的技术路线进行。本项目的研究结果显示，在SAH后，PAR-1和PAR-4在早期（即SAH后的2-6小时）即发生了活化，并在随后的病理过程中参与了脑内MG的激活，通过PAR-1/4-p38MAPK-NF-κB-炎性因子通路形成了明显的脑内非特异性炎症，从而造成脑内MG周围的神经元和血管内皮细胞的凋亡，引起血脑屏障的破裂和神经功能的损伤，产生SAH后的早期脑损伤（EBI）。同时，本项目的研究结果还显示，早期应用PAR-1和PAR-4的小干扰RNA抑制二者在SAH后小胶质细胞活化中的作用，会产生显著的缓解血脑屏障破裂和神经功能损伤的治疗作用，这也间接地证实PAR-1和PAR-4的确在SAH后对于小胶质细胞诱导的脑内炎症发挥着重要作用。此项目的研究结果与当初的实验假设基本相符，达到了预期的实验目的。在此项目完成过程中，培养了研究生一名，相关的实验结果我们发表了一篇中文的核心期刊，同时还有一篇英文文章也将投出。另外，在本基金的支持下，本实验团队还完成了两篇SCI文章的部分工作，并分别发表在CNS: Neuroscience and Therapeutics, 2012; 18: 334–342.（IF=4.4）和 Exp Neurol. 2011;230(2):240-7.（IF=4.7）上。