nm23转基因小鼠的建立及其抗肿瘤形成与转移作用研究

本实验从PCDNA3为载体，将nm23H1cDNA分别正反向插入白蛋白启动子及cMV启动子下游，构建nm23H1正，反义表达载体4种，并转染入人肝癌细胞SNMC-7721用Northern blot和Wertern bolot筛选出nm 23H1高表达细胞克隆AN2和低表达细胞克隆AM1，测定细胞生长曲线，用流式细胞仪观察细胞DNA含量及凋亡，并接种裸鼠观察对肿瘤形成和转移能力的影响，结果发现nm23H1基因在低表达时细胞增殖加速，在裸鼠接种时肿瘤形成和转移能力增加，同时在流式细胞仪上观察到出现凋亡峰，约4.5%。采用显微注射制备转基因小鼠，发现死胎、流产率很高，得不到转基因小鼠，而我室制备转基因小鼠阳性率为30%-60%，提示该基因对小鼠胚胎发育可能也有重要影响。