电针对面神经损伤后Cyto-c、caspase-9、caspase-3表达调控及介入时机的研究

Acupuncture & Moxibustion have the ADVANTAGE in Facial nerve injury (facial paralysis ) treatment. Electro-acupuncture is widely used in facial paralysis. The mechanism research have been done mainly through molecular biology . Further research on facial neuron apoptosis regulation should go deeper..Based on the clinical curative effect and the key point of cell apoptosis (caspase family), we'll study the effect on neuronal survival, axon ultra-structure , Cyto-c, caspase-9, caspase-3 expression and selection of therapy time.So the result will provide a scientific basis for electro-acupunture on facial nerve injury.

面神经损伤（面瘫）是针灸治疗的优势病种之一，电针治疗被广泛应用到临床中，电针治疗面瘫的机制研究，目前主要通过分子生物学如：NGF(神经生长因子)、NT-3（神经营养素-3）、神经营养因子NGFmRNA的表达及黏附分子的表达进行研究，以上均由靶器官或神经元分泌并能促进神经元的存活以及神经元轴突的再生。对细胞凋亡调控的机制研究尚需进一步研究。.本课题基于临床疗效肯定的前期研究基础，从细胞凋亡的关键环节caspase家族入手，观察家兔面神经损伤后电针刺激"地仓"、"下关"、"太阳"、"阳白"四穴，对其神经元的存活、轴突超微结构和Cyto-c、caspase-9、caspase-3蛋白表达的影响，探讨不同时期电针治疗的介入对细胞凋亡的调控作用，为电针治疗面神经损伤提供确切的科学依据。

目的：研究电针对面神经损伤后Cyto-c、caspase-9、caspase-3表达调控及其介入时机，为临床治疗提供依据。.方法：采用压榨法对新西兰兔面神经干颊支进行Sunderland Ⅲ级损伤造模，治疗组于急性期、7d后予电针或针刺，穴位选用地仓、下关、太阳、阳白，其他组不干预只相同抓取，共28d。观察兔面肌运动情况并评分，对面神经进行病理组织学观察，对面运动神经元的存活、和Cyto-c、caspase-9、caspase-3蛋白表达进行检测。.结果：①面肌运动评分比较：干预7d后电针1组与电针2组面肌运动开始恢复（P<0.05），14d、21d、28d时电针1组明显优于其他治疗组（P<0.05）。②面神经形态学比较：轴突计数比较：电针1组损伤近端轴突计数高于其他治疗组（P<0.05），且接近空白对照组水平；损伤段与损伤远端各治疗组间无显著性差异，与正常组、假手术组、模型组差异有统计学意义（P<0.05）；髓鞘厚度及轴突面积比较，不同损伤段电针1组与针刺1组、空白对照组、假手术组均无显著性差异，均高于模型组与电针2组、针刺2组（P<0.05），电针2组与针刺2组组间比较无差异但均高于模型组（P<0.05）。③面神经运动神经元存活率比较：各治疗组神经元存活率较模型组高（P<0.05）；针刺2组神经元存活率较电针1组低（P<0.05）。④Cyto-c、caspase-9、caspase-3表达比较：各治疗组各指标的阳性表达较模型组低（P<0.05），其中电针1组Cyto-c表达最低（P<0.05），针刺2组最高（P<0.05）；各治疗组间caspase-9表达无差异；针刺1组、针刺2组Caspase-3的阳性表达与电针1组及电针2组比较较高（P<0.05）。.结论：本研究表明，对于新西兰兔Suderland III 级面神经损伤模型，早期行针刺尤其是电针治疗可明显改善面肌运动情况，缩短疗程。其机理表现在周围神经修复方面可延缓或防止面神经损伤发生沃勒变性，促进轴索的再生及髓鞘的恢复，在面神经运动神经元逆性损伤调控方面通过电针对穴位持续性刺激，抑制Cyto-C释放，从而抑制Caspase-9、Caspase-3的释放，降低神经元凋亡，维持神经元活性，有效延缓或阻止面神经损伤处髓鞘或轴突的破坏，从而促进神经的恢复。