Ptpn22对B淋巴细胞的调控在NOD小鼠自身免疫糖尿病发病中的作用

Among more than 50 susceptibility genes discovered so far, the gene PTPN22 ranks the second position. Therefore, it is of great significance to study the mechanisms of PTPN22 in autoimmune diabetes. In our previous study, we generated a transgenic Non-obese diabetic (NOD) mouse line (P2 mouse) in which Ptpn22 can be inducibly silenced. We found that Pptn22 silencing protects mice from diabetes, and in in vitro experiments enhances B cell activation, proliferation and apoptosis. However, how Ptpn22 regulates B cell subsets and function in vivo is still unknown. So far a large amount of studies have demonstrated that B cell subsets and function are essential in the progression of autoimmune diabetes. Here we will study the roles of Ptpn22 on B cell subset distribution and function to reveal how Ptpn22 regulates the pathogenesis of autoimmune diabetes through B cells. Our work may provide solid experimental data for the application of PTPN22-related drugs in clinical trials and the treatment of autoimmune diabetes.

疾病易感基因PTPN22对1型糖尿病疾病发生的贡献在50多个易感基因中位列第二位。因此，深入研究PTPN22调控糖尿病发生的作用机制具有重要意义。我们前期的工作构建了Ptpn22可被诱导性沉默的Non-obese diabetic (NOD)小鼠 （P2小鼠）。Ptpn22沉默后NOD小鼠发病率降低，在体外实验中B细胞的活化、增殖和凋亡增强。但是在体内Ptpn22对B淋巴细胞的亚群组成和功能有何影响还不清楚。目前有大量研究表明B淋巴细胞的亚群组成和功能在自身免疫糖尿病发病过程中起着非常重要的作用。因此，通过转基因P2 NOD小鼠深入研究Ptpn22在体内如何调节B细胞的亚群组成和功能，不仅能揭示Ptpn22如何通过调控B细胞进而影响1型糖尿病的发生、发展，而且为PTPN22相关潜在药物应用于临床试验，进而治疗1型糖尿病奠定更坚实的基础。

疾病易感基因PTPN22对1型糖尿病疾病发生的贡献在50多个易感基因中位列第二位。因此深入研究PTPN22调控糖尿病发生的作用机制具有重要意义。既往研究发现Ptpn22对NOD小鼠T细胞中的调节性T细胞具有选择性的调控作用，但是对B淋巴细胞的调控作用和机制未明。本研究旨在探讨Ptpn22对B细胞亚群和功能的调节和机制，以及在疾病发生中的作用。首先，我们发现Ptpn22是B细胞亚群调控的重要分子。Ptpn22沉默在骨髓中增强了B细胞发育的阳性选择，表现为更多的B细胞含量，减少的pre-B细胞和增加的循环成熟B细胞；在腹腔中降低了腹膜腔中B1（包括B1a, B1b）细胞的含量，升高了其保护作用的B2细胞；在脾脏中降低了MZ B细胞，升高了FO/MZ比例。进而，我们发现Ptpn22对B细胞亚群的调节主要是通过影响细胞增殖来实现的，而对B细胞亚群的凋亡无明显影响。另外，我们发现Ptpn22沉默显著降低了脾脏中浆细胞频率和浆细胞的体外分化，导致血清中anti-dsDNA和anti-insulin自身抗体水平降低。最后，我们运用细胞过继转移实验，将致病性T细胞与WT B细胞或Ptpn22沉默B细胞混合，转移到NOD.SCID小鼠中，发现Ptpn22沉默B细胞能明显降低受体鼠的发病率。我们顺利完成项目研究目标，阐明了Ptpn22对B细胞亚群的调控和机制以及在疾病发生中的作用。我们的研究不仅能揭示Ptpn22如何通过调控B细胞进而影响1型糖尿病的发生、发展，而且为PTPN22相关潜在药物应用于临床试验，进而治疗1型糖尿病奠定更坚实的基础。