近场光学研究量子点示踪的干细胞定向分化

为了研究胚胎干细胞向肝干细胞（卵圆细胞）和肝细胞的定向分化机制，需要探测单个生物分子在细胞表面及细胞内的运动过程。本项目拟采用近场光学显微镜和原子力显微镜以达到单分子分辨率，用量子点(QDs)标记分子以增强单分子荧光强度和荧光寿命。将细胞分化标志物A6、ALB的抗体分别偶联到不同激发波长的QDs探针上，同时标记诱导分化过程中的细胞，在单细胞水平上跟踪观察胚胎干细胞如何逐步向卵圆细胞和肝细胞转化。将不同生长因子EGF、HGF偶联到不同激发波长的QDs探针（如QDs535-EGF和QDs 630-HGF），探测量子点标记的HGF和EGF与细胞表面相应的受体HGFR和EGFR如何在表面结合，以及在细胞表面和细胞内运动等，了解干细胞分泌的蛋白因子和其表面膜受体蛋白在调节干细胞增殖分化中的作用，寻找高转化率的生长因子。探索干细胞向不同组织功能细胞分化的分子调控机制。