钙池操纵性钙内流在非小细胞肺癌中的改变和功能研究

肺癌发病率高、死亡率列各类恶性肿瘤之首。新型诊治措施的建立依赖于对肺癌病理机制的进一步研究和认识。吸烟与肺癌的关系密切，但其致癌机理还不完全清楚。钙离子（Ca2+）是细胞增殖、分化、基因转录等生命活动的重要信使分子，细胞膜表面的钙池操纵性钙通道（SOCC）开放所形成的钙池操纵性钙内流（SOCE）是调节Ca2+在细胞内稳态平衡的重要途径。基于前期我们对SOCC和 SOCE的调控和功能的研究, 本课题旨以肺癌中发病率最高的非小细胞肺癌(NSCLC)为研究对象，探讨NSCLC中SOCE及SOCC构成蛋白- - 瞬时受体电位通道蛋白(TRPC)和钙释放激活的钙调节蛋白（Orai）的表达变化，观察siRNA基因沉默或应用化学阻断剂干预SOCE后对肺癌恶性生长行为的改变，并研究这些变化与吸烟烟雾中的有效成分- - 尼古丁的关系。本研究将对肺癌病理机制提出新见解，为开发防治作用的新药奠定基础。

本项目通过研究钙池操纵性钙内流在非小细胞肺癌中的改变和功能，从一个崭新的角度认识吸烟与肺癌关系的分子机制。本项目进展顺利，按照申请书的研究计划和实验路线，逐层深入研究，高质量完成了本课题研究内容。通过本项目的研究，我们取得了以下关键研究结果：1）明确TRPC、ORAI和STIM在人NSCLC组织和细胞中的表达情况，阐明它们对癌细胞中SOCE的贡献；2）证明沉默TRPC、ORAI、STIM和阻断SOCE能抑制肺癌细胞的恶性生长行为（包括增殖，侵袭、迁移和在软琼脂凝胶中的克隆性生长）；3）证明香烟烟雾中的主要有害成分——尼古丁上调TRPC、ORAI和STIM的表达，增加SOCE和肺癌细胞内基础Ca2+的浓度。我们证明，在香烟烟雾中主要有害成分尼古丁的长期刺激下，肺癌细胞内的TRPC/ORAI/STIM表达增高，SOCE和细胞内基础钙离子浓度([Ca2+]i)相应增加，从而影响癌细胞的恶性生长。通过本项目的研究，为肺癌的病理机制提出新见解，为该类疾病的防治提供新的分子靶点，为新药研究奠定了理论基础。