重组Dicer酶介导、靶向EGFR的“siRNA鸡尾酒”治疗脑胶质瘤的实验研究

拟应用先进的杆状病毒蛋白表达系统表达并纯化RNA干涉的关键酶Dicer，进行体外切割实验以验证重组Dicer酶（hDicer）的效能并摸索优化反应条件；同时在人恶性脑胶质瘤细胞系TJ905细胞内过表达hDicer，进一步研究细胞过表达Dicer对转染外源性基因表达的影响。以表皮生长因子受体（EGFR）过表达的TJ905细胞系为研究对象，针对EGFR比较反义RNA、单个siRNA表达载体与hDicer介导的siRNA鸡尾酒技术对内源性基因表达的抑制作用及对细胞增殖、凋亡的影响，进行体内实验研究上述各种治疗方法对体内实验动物致瘤性的影响及其生物效应。本课题的实施可以建立hDicer的表达与体外切割的优化反应条件，并同时在体内外比较反义RNA、单个siRNA表达载体和hDicer介导的siRNA鸡尾酒治疗胶质瘤的效果，为进一步提供胶质瘤基因治疗的优选策略和Dicer酶的批量生产应用奠定基础。