肠三叶因子受体cDNA的筛选、受体蛋白氨基酸序列分析及结构预测

肠三叶因子（ITF）是一种特异分布于肠道的具有"三叶草型"空间结构的特殊生长因子，对肠道具有很强的保护作用。对ITF受体的研究有助于阐明ITF促进细胞增殖、减轻损伤、促进修复的机制及可能的信号转导通路。本研究在已获得重组表达ITF的基础上，进行ITF受体的相关研究，首先采用同位素标记ITF，通过受体结合和受体定位实验对肠上皮细胞膜上ITF受体进行定量和定位研究，并对ITF及其受体的结合特性进行初步分析。在此基础上采用分子筛、亲和层析等手段分离、纯化ITF受体，获取的受体蛋白通过氨基酸末端序列分析，合成特异的ITF受体探针。在成功构建肠上皮细胞cDNA文库的基础上，通过2次杂交筛选ITF受体全长cDNA，推导其全长氨基酸序列，数据库比对后进行受体蛋白结构和功能预测，为进一步研究ITF的信号转导机制打下基础。