植物胞间连丝蛋白质组分的研究及其基因分析

以玉米为材料，建立了分离纯化植物细胞壁及其蛋白质的方法。经光镜和电镜检测表明所纯化的细胞壁具有“双层”结构及残留的胞间连丝结构。用生化和免疫学方法从中分离出了胞间连丝的可能蛋白质组分，经SDS-PAGE分析表明它有两个主要多肽组分（50KD和62KD）。用抗间隙连接蛋白抗体进行免疫杂交和定位研究，结果表明：50KD多肽可能是胞间连丝的成分。用免疫荧光标记和电镜技术研究表明在刚分离的蚕豆叶肉细胞原生质体表面上有间隙连接蛋白类似物，它可能是胞间连丝颈区残留的部分。将上述50KD多肽纯化后进行蛋白酶酶解，分离后选取主要组分进行氨基酸序列分析，据此设计引物，进行PCR扩增，得到0.75kb片段，再将其克隆到PGEM质粒上。