TLR-2/IL-23/IL-17通路介导小胶质细胞炎性反应在脑缺血再灌注损伤中作用

脑缺血再灌注损伤是一复杂的病理生理过程,免疫机制在脑缺血再灌注损伤中的作用正受到广泛关注。小胶质细胞是神经-免疫-内分泌系统的核心细胞, 在中枢神经系统的免疫应答中发挥关键作用。近来发现某些Toll-like receptors ( TLRs )是小胶质细胞行使免疫功能的信号转导受体之一。这些TLR信号成为一个激活小胶质细胞和调节其功能的重要控制开关。我们的前期研究工作发现在大鼠局灶脑缺血再灌流模型缺血脑组织中小胶质细胞TLR-2/IL-23/IL-17均有表达，说明该途径确实参与了脑缺血再灌注损伤过程。目前该途径在脑缺血再灌注损伤中的具体作用机制尚不清楚。如果干预此通路也许会成为未来治疗脑缺血再灌注损伤的新靶点，将具有重要的理论价值和临床意义。

目的：脑缺血再灌注损伤是一复杂的病理生理过程,免疫机制在脑缺血再灌注损伤中的作用正受到广泛关注。小胶质细胞是神经-免疫-内分泌系统的核心细胞, 在中枢神经系统的免疫应答中发挥关键作用。近来发现某些Toll-like receptors ( TLRs )是小胶质细胞行使免疫功能的信号转导受体之一。激活的TLRs促进小胶质细胞表达炎性因子白介素-23（IL-23）、 白介素-17（IL-17）。由此可见TLR2/IL-23/IL-17轴在小胶质细胞调节免疫功能中发挥重要作用。本研究通过检测脑缺血再灌注中小胶质细胞中TLR2/IL-23/IL-17轴对神经元的凋亡情况，进一步探讨其机制。.方法：我们采用免疫组化及激光共聚焦方法观察在体内和体外试验中脑缺血再灌注后小胶质细胞表达TLR2，IL-23和IL-17的情况；应用western-blot 和ELISA方法检测小胶质细胞在胞质和上清液中分泌炎性因子的情况；并且采用SiRNA技术干扰分别抑制TLR2，IL-23和IL-17，观察炎性因子表达和神经元凋亡等指标；加入外源性IL-17，应用TUNEL及流式细胞仪检测神经元凋亡和线粒体膜电位水平。我们采用TTC染色与TUNEL方法对TLR2单克隆抗体干预后模型鼠缺血脑组织脑梗死体积与凋亡细胞进行观察，应用多因子蛋白生物标志物检测系统检测TLR2单抗干预模型鼠脑组织中IL-1β、TNF-α、IL-23、IL-17的含量。.结果：脑缺血再灌注及缺氧缺糖再灌注（OGDR）小胶质细胞按时见先后顺序表达TLR2，IL-23和IL-17；OGDR小胶质细胞释放IL-23和IL-17炎性因子，并且诱导神经元凋亡；分别抑制TLR2，IL-23和IL-17，其下游炎性因子及神经元凋亡均明显减少，TLR2作为上游信号诱导下游IL-23，IL-17产生；外源性IL-17加重缺氧后神经元的损伤。脑缺血再灌注后TLR2单抗干预模型鼠的梗死体积和凋亡细胞减少，TLR2单抗干预后模型鼠脑组织中IL-1β、TNF-α、IL-23、IL-17的含量减少。.结论：TLR2/IL-23/IL-17 通路介导小胶质细胞炎反应在脑缺血再灌注损伤中有重要作用;干预此通路也许会成为未来治疗脑缺血再灌注损伤的新靶点，将具有重要的理论价值和临床意义。