脂类和抗氧化营养素对中华绒螯蟹免疫机能的影响和调节作用

甲壳动物的非特异性免疫和对脂类需求的特性，决定了脂类营养与机体免疫应答和抗感染力之间的关系密切。本申请以中华绒螯蟹（E.sinensis）为对象，结合室内和室外对比饲养试验，比较正常（常规）和受胁迫状态下，动物对脂类和抗氧化营养素（Ve、Vc和硒）单一或协同作用下的生理、免疫响应差异；综合机体对入侵异物的免疫灵敏性、清除异物后的平衡性，以及活体攻毒试验的结果，建立有效和科学的评价指标；查明脂肪（酸）的"质"和"量"及其与抗氧化营养素对河蟹生长发育、免疫机能与抗感染力的影响，以及基于提高免疫机能的脂肪（酸）需要量和鱼油的合理替代比例；探讨脂类与动物代谢酶（或免疫）相关基因表达之间的关系，以阐明脂肪（酸）对蟹免疫应答和调控的分子机制。在此基础上，筛选出能缓解环境胁迫、促进免疫机能的营养素合理搭配，并确定其适宜添加量。以促进甲壳动物营养与免疫学的研究，指导虾、蟹人工配饵的生产。

甲壳动物的非特异性免疫和对脂类需求的特性，决定了脂类营养与机体免疫应答和抗感染力之间的关系密切，迄今有关脂类营养与甲壳动物生理和免疫性能之间关系的研究较少。本项目以我国重要的经济甲壳动物中华绒螯蟹（E.sinensis）为对象，结合室内和室外对比饲养试验，在探索饲料不同脂肪源、鱼油替代比例对中华绒螯蟹生长和免疫性能影响的基础上，查明了幼蟹必需脂肪酸的适宜需要量，研究了饲料中脂肪源（脂肪酸）和抗氧化维生素E、C的可能交互作用，以及矿物质和维生素单一或协同作用对蟹生长、抗氧化和免疫性能的影响。取得的主要结果和结论如下：.一．采用单因素梯度法，结合生长性能、生理指标和非特异性免疫指标可知，亚麻酸对幼蟹免疫功能的调节作用大于亚油酸；以增重率为判据进行分析的结果，幼蟹对亚麻酸、n-3HUFA的适宜需求量分别为1.24%和1%；n-3/n-6在0.56~0.74之间能够使中华绒螯蟹获得最佳生长性能；脂肪源筛选和鱼油替代的试验结果，证实用豆油完全替代饲料中的鱼油，会显著降低其免疫性能和抗病力，用75%豆油替代鱼油可在保证幼蟹获得良好生长性能的同时，有效提高机体的免疫性能和抗病力。.二．较为系统的研究了维生素E对脂肪、高度不饱和脂肪酸及氧化脂肪的保护作用，结果表明，合理添加维生素E 可以保护HUFA免受脂质过氧化，而饲料中适量的HUFA可以有效地提高幼蟹的生长性能、非特异性免疫性能和抗病力；研究发现过氧化值为119 meq kg-1的氧化鱼油会显著损伤了幼蟹的正常生长，而维生素E可以缓解一定程度的氧化鱼油对机体造成的损伤作用；进一步研究还发现，维生素C可以通过还原维生素E的自由基形式而使维生素E重生，故能有效节约饲料中的维生素E。维生素E和维生素C添加量过低或过高均会产生氧化应激，建议幼蟹饲料中补充维生素E和C的量分别为100 mg kg-1和100 mg kg-1。.三．定量研究了幼蟹对饲料中矿物质硒、镁、铜、维生素B12、叶酸的适宜需要量，在此基础上，探讨了叶酸和维生素B12 (VB12)协同作用对中华绒螯蟹幼蟹生长、非特异性免疫和抗病力的影响。结合生长性能、生理和非特异性免疫指标可知，饲料中添加叶酸可以有效地缓解亚硝酸盐对中华绒螯蟹幼蟹的毒性，提高幼蟹的非特异性免疫力。.上述成果丰富了虾、蟹等经济甲壳动物免疫营养学的内容，并可以为中华绒螯蟹的饲料研制和养殖生产提供必备的基础。