PARP-1抑制剂对XRCC2缺陷型结直肠癌治疗作用的研究

PARP-1抑制剂给肿瘤个体化治疗带来新的希望，它对DNA同源重组修复基因BRCA缺陷的肿瘤非常敏感。最新研究发现，除BRCA外，其它同源重组修复基因缺陷的肿瘤对PARP-1抑制剂也敏感。为此，我们对另一个与结直肠癌密切相关的同源重组修复基因XRCC2进行了初步研究，利用siRNA同时靶向干扰结肠癌细胞株SW480的PARP-1和XRCC2，发现细胞活性显著降低。因而我们认为PARP-1抑制剂对XRCC2缺陷的结直肠癌也有效。本研究拟通过转染SV40构建XRCC2-/-结直肠癌永生细胞系，应用该细胞系进行药物敏感实验，观察PARP-1抑制剂对细胞活力和同源重组修复的影响；建立裸鼠荷瘤模型观察PARP-1抑制剂体内治疗效果；并对同源重组修复失败后细胞转归- - 细胞自噬现象及其调控机制进行研究，旨在获得PARP-1抑制剂治疗XRCC2缺陷型结直肠癌的直接证据，为结直肠癌的个体优化治疗提供依据。

项目背景：合成致死理论认为同源重组修复基因XRCC2缺陷的细胞对PARP1抑制剂的敏感性高于XRCC2高表达细胞。我们拟研究XRCC2在结直肠癌细胞中的表达与功能，分析PARP1抑制剂对不同XRCC2表达水平的结直肠癌细胞的敏感性，为结直肠癌的靶向治疗提供理论依据。.研究内容：我们检测了XRCC2在结直肠癌组织中的表达情况及其与miR-7的关系；分析了PARP1抑制剂Olaparib与奥沙利铂的相互作用及其对携带XRCC2-rs3218536点突变结直肠癌细胞的敏感性；成功构建了XRCC2高表达、低表达的SW480稳定细胞株，并分析XRCC2对结直肠癌细胞增殖、凋亡、周期、直肠癌放疗的影响。.重要结果：XRCC2在结直肠癌组织中的表达明显高于配对的癌旁组织，且与肿瘤大小、Dukes分期、TNM分期等临床病理特征密切相关；miR-7在结直肠癌中低表达，并证实了XRCC2是miR-7的靶基因。LoVo细胞携带XRCC2基因rs3218536点突变，且对Olaparib最不敏感；Olaparib可显著增强奥沙利铂对结直肠癌细胞的敏感性。成功构建了XRCC2高表达（SW480-XRCC2）、低表达（SW480-XRCC2/RNAi）的SW480稳定细胞株，研究结果表明XRCC2高表达促进结直肠癌细胞增殖，增加G0/G1期细胞比例，XRCC2低表达增加细胞凋亡，DNA双链损伤修复延迟，增敏直肠癌放疗；Olaparib抑制结直肠癌细胞增殖，且对XRCC2高表达的细胞株更为敏感。.关键数据及其科学意义：XRCC2高表达促进结直肠癌细胞增殖，增加G0/G1期细胞比例，XRCC2低表达增加细胞凋亡，增敏直肠癌放疗；Olaparib抑制结直肠癌细胞增殖，且对XRCC2高表达的细胞株更为敏感。实验结果证明XRCC2是预测直肠癌放化疗敏感性的生物标志物，为临床建立个体化治疗方案打下了基础。