lnc-XLOC作为ceRNA参与miR-155调控脊柱结核椎间盘破坏过程中的作用机制研究

In recent years, with the growth of immune diseases, the incidence of spinal tuberculosis increased year by year, but the destruction mechanism of spinal tuberculosis disc is still unclear. Our initial study found that miR-155 regulates the release of matrix metalloproteinases (MMP-8, -9, -13) during spinal disc disruption. In this project, the concept of ceRNA was introduced into the regulation mechanism of mir-155 in the destruction of intervertebral disc. The research of lnc-RNA was carried out by using bioinformatics prediction, qRT-PCR,Pulldown,Northern blot and luciferase reporter gene system. To investigate the effect of lnc-XLOC on the regulation of mir-155, to clarify the regulation mechanism of lnc-XLOC, to provide a new idea for studying the mechanism of spinal disc disruption, and to provide experimental basis for finding new targets for treatment of spinal tuberculosis

近年来随着免疫性疾病的增长，脊柱结核发病率逐年增加，但脊柱结核椎间盘的破坏机制仍然不清。我们的初期研究发现在脊柱结核椎间盘破坏过程中，miR-155调控基质金属蛋白酶（MMP-8、-9、-13）的释放并且与lnc-XLOC表达相关。本项目将ceRNA的概念引入到miR-155在椎间盘破坏的调控机制中，拟综合运用生物信息学预测、qRT-PCR、Pulldown、Northern blot及荧光素酶报告基因系统等研究技术，分析lnc-XLOC作为ceRNA对mir-155调控作用,明确lnc-XLOC的调控机制，为研究脊柱结核椎间盘破坏机制提供新的思路,为寻找脊柱结核治疗干预的新靶点提供实验基础

脊柱结核为骨关节结核病中最常见的类型（约占75%),通常导致椎体和椎间盘的破坏，使脊柱稳定性丧失，压迫脊髓造成截瘫及脊柱后凸畸形，因此脊柱结核给人体带来的破坏性和致残率远远高于其他骨结核和肺外结核。然而目前对于脊柱结核中椎体和椎间盘的破坏机制研究较少，因此有必要研究脊柱结核中椎间盘破坏的发生和发展机制，为其有效防治提供新理论和药物治疗新靶点。本课题组通过收集临床脊柱结核和外伤患者标本，运用生物信息学预测、qRT-PCR、流式细胞等分子生物技术，分析lnc-XLOC作为ceRNA对mir-155调控作用,结果表明脊柱结核患者椎间盘中Lnc-XLOC激活下游miR-155的表达,从而促进MMP-8、MMP-9的表达并抑制MMP-13的表达进而调控椎间盘的破坏，此外我们发现在骨结核患者中，m1 -巨噬细胞的数量上调， m1 -巨噬细胞与m2 -巨噬细胞的比值也上调，其中STAT1和CXCL10参与M1-巨噬细胞极化，与骨结核的发病机制相关。上述研究的完成及脊柱结核椎间盘破坏机制的探索，为以后临床中脊柱结核的防治提供新思路和新靶点。项目资助发表论文11篇，培养博士研究生2名，硕士研究生1名，其中1名博士已取得学位。