猪博卡病毒zj11株致病关键因子挖掘及验证

Porcine bocavirus (PBoV), a small, single-molecule, linear DNA nonenveloped virus, was first isolated from the lymph nodes of pigs with Postweaning multisystemic wasting syndrome in 2009. Previrous studies revealed that it might be the most important reason for the renewed outbreak of pig diarrhea in recent years. Due to the lack of PBoV virulent strain, the pathogenic determinants and the pathogenic mechanism are still unclear, which implys that there hasn't any effective preventive and therapeutic strategies for PBoV. Luckly, we isolated a PBoV (PBoV/zj11 strain) and confrimed it can cause piglet diarrhea. In order to isolate the possible pathogenic determinants of PBoV/zj11 strain, we are going to use RNA-Seq technique to detect the transcriptome change in PBoV/zj11 strain-infected piglets, along with the analysis of the pathological morphology and cytokine changes.When obtained the candidated determinant genes, we will build overexpression and RNA interference vectors and transfect them to cell model (IPEC-J2) to identify their functions. Taken together, the identification of PBoV pathogenic determinants will help to elucidate the underlying pathogenic mechanism and to develop vaccine and prevention mehod for PBoV, which in the end plays an important role in the sustainable development of swine industry.

猪博卡病毒（PBoV）是2009年首次在患有断奶仔猪多系统衰竭综合症的猪淋巴结中检测到的一种单股线状DNA病毒，前人研究揭示其可能是近年来仔猪腹泻病重新爆发的一个重要原因。由于缺少相关毒株，目前其致病性关键因子和机理解析等方面未见相关报道，致使PBoV处在无苗可防，无药可治状态。项目申请者前期研究分离得到一株PBoV，并证实其导致仔猪发生腹泻。进一步，本项目拟将通过人工感染仔猪，采用转录组测序技术分析仔猪感染PBoV/zj11毒株后转录水平上的差异、结合病理学分析和细胞因子变化等相关研究，确定PBoV感染致病的候选关键因子；然后构建超表达和RNAi干涉载体，通过转染猪肠上皮细胞（IPEC-J2）对其候选关键因子进行验证，从而确定PBoV致病的关键因子。通过本项目研究，可以为PBoV致病机理解析奠定基础，为后期疫苗研发和综合防控由PBoV引发的疾病提供科学依据。

猪博卡病毒（PBoV）是 2009 年首次在患有断奶仔猪多系统衰竭综合症的猪淋巴结中检测到的一种单股线状 DNA 病毒，前人研究揭示其可能是近年来仔猪腹泻病重新爆发的一个重要原因。由于缺少相关毒株，目前其致病性关键因子和机理解析等方面未见相关报道，致使 PBoV 处在无苗可防，无药可治状态。项目申请者前期研究分离得到一株 PBoV，人工感染3日龄仔猪，可以使仔猪发生腹泻。三年来，课题组研究取得一下结果：1发现PBoV感染肠上皮细胞系（IPCE-J2），导致细胞病变，细胞因子芯片检测发现许多与炎症有关的细胞因子差异表达显著。2. 基因组测序和序列分析发现目前的PBoV可以分为6个基因群，首次发现基因群Ⅰ- Ⅳ的VP1u氨基酸序列中含有具有磷脂酶A2活性的“HDXXY”和“YXGXF”保守基序，但基因群Ⅴ和基因群Ⅵ的VP1u氨基酸序列中这两个保守基序缺失。3.归因风险分析发现PBoV单独感染不是猪腹泻的病因，PBoV主要存在于感染猪的肠道。4.建立了PBoV感染间接ELISA检测方法。.通过本项目研究，为 PBoV 致病机理解析奠定良好基础，可以为后期疫苗研发和综合防控由 PBoV 引发的疾病提供科学依据。